趣味の顕微鏡あそび

妻曰く、道具をそろえ終わると趣味が終わるそうだ。

ブログタイトル

顕微鏡観察の教本。


珪藻フォーラムに参考になる文献のアドレスがのっていた。

さっそく覗いてみると、英語なので、さっそくGeminiで翻訳してもらった(笑)

 

https://ia802906.us.archive.org/4/items/in.ernet.dli.2015.15164/2015.15164.Microscopic-Objects.pdf

 

承知いたしました。以下に翻訳したテキストをMarkdown形式で記述します。

Markdown

# 顕微鏡観察用試料の準備とマウント方法

 

## Birla Central Libraryからの情報

* 図書分類: 578.6 [cite: 2]

* 書籍番号: 763M [cite: 3]

* 蔵書番号: 35424 [cite: 4]

* 所在地: PILANI (Jaipur State) [cite: 1]

 

## 顕微鏡について

  1. BAKER of HOLBORN LTD. (ロンドン、ハイホルボーン244番地) は、B.L.M.シリーズの顕微鏡、特に学生やアマチュア向けのMODEL 3.E.S.を提供しています [cite: 5, 6, 8]。同社の製品は、デザイン、仕上げ、機械的性能、光学性能において世界的な評価を得ています [cite: 9]。提供される顕微鏡は、分割引き出し筒、ダブルノーズピース、アッベコンデンサー、接眼レンズ (x5, x10)、対物レンズ (x10 (2/3インチ), x40 (1/6インチ)) を備え、価格は£38.17.0です [cite: 10]。解剖顕微鏡、ミクロトーム、マウント台、拡大鏡(ポケット用、解剖用)、および標本準備・マウントに必要なあらゆる器具も提供しています [cite: 10]。

 

中古の科学機器の売買、交換、委託販売も行っており、高値で買い取るとのことです [cite: 11, 12, 13]。

 

## 「MICROSCOPIC OBJECTS HOW TO MOUNT THEM」という書籍について

* 著者はJEAN C. JOHNSONです [cite: 23]。

* 出版社はTHE ENGLISH UNIVERSITIES PRESS LTD. (ロンドン、セントポールズハウス、ウォーウィック・スクエア、E.C.4) です [cite: 24, 25, 26]。

* 初版は1935年9月、増刷は1944年7月、第2版は1948年5月です [cite: 27]。

* 本書の目的は、顕微鏡観察用の試料を準備・マウントする初心者を手助けすることです [cite: 31, 32, 34]。顕微鏡そのものに関する補足的な章ではなく、この主題に特化している点が特徴です [cite: 33]。

* W. Watson & Sons, Ltd.からイラスト用のブロックが提供されています [cite: 42, 43]。

* J. McCartney, Esq., M.D.とW. R. Dracass, Esq.がこの本の改訂に協力しています [cite: 46, 47]。

 

## 目次

本書の目次は以下の通りです:

* 序文 (Vページ) [cite: 50]

* I. 必要とされるもの (1ページ) [cite: 50]

* II. 昆虫のマウント (7ページ) [cite: 50]

* III. 珪藻の洗浄とマウント (22ページ) [cite: 50]

* IV. 有孔虫、放散虫、骨針の洗浄とマウント (44ページ) [cite: 50]

* V. 化学結晶のマウント (49ページ) [cite: 50]

* VI. 岩石と金属切片の準備 (58ページ) [cite: 50]

* VII. 血液塗抹標本と細菌 (64ページ) [cite: 50]

* VIII. 動物組織の準備 (77ページ) [cite: 50]

* IX. 包埋と切断 (90ページ) [cite: 50]

* X. 染色液と染色 (98ページ) [cite: 50]

* XI. 植物組織の準備とマウント (109ページ) [cite: 50]

* XII. グリセリンとグリセリンゼリーでのマウント (118ページ) [cite: 50]

* XIII. 不透明マウント (129ページ) [cite: 50]

* XIV. 調合法 (133ページ) [cite: 50]

* 重さ、量、換算表 (140ページ) [cite: 50]

* 参考文献 (143ページ) [cite: 50]

* 索引 (144ページ) [cite: 50]

 

## マウントの技術と必要な道具

顕微鏡観察のためには、試料の特別な処理と操作が必要です [cite: 57]。良好なマウントを作成するには、清潔さと秩序が非常に重要です [cite: 102]。使用するツールやガラス器具は常に清潔に保ち、使用後は丁寧に片付ける必要があります [cite: 105]。

 

本書では、以下の道具が推奨されています:

* 良質な単純顕微鏡(接眼レンズ $\times6$ と $\times10$、対物レンズ 2インチ、2/3インチ、1/6インチ、サブステージコンデンサー付き) [cite: 65, 66]

* ミクロトームとナイフ(Cathcart-Darlastonのような安価で効率的なものが推奨) [cite: 66]

* 各種解剖用具:メス(刃渡り2インチと$1\frac{1}{4}$インチ)2本 [cite: 67]、眼用ナイフ1本 [cite: 67]、4 1/2インチの真っ直ぐな先細ハサミ1組 [cite: 68]、4 1/2インチの曲がった先細ハサミ1組 [cite: 68]、4 1/2インチの真っ直ぐな先細ピンセット1組 [cite: 68]、4 1/2インチの曲がった先細ピンセット1組 [cite: 69]、金属製切片リフター1本 [cite: 69]、木製ハンドルの解剖針6本、または金属製針ホルダー2本と針の予備 [cite: 70, 71]、様々な太さのセーブル毛ブラシ6本 [cite: 71]

* 実験器具:鉛付きコルクマット2枚 [cite: 71]、水中で解剖するための浅い皿2枚 [cite: 72]、沸騰用フラスコ3本 [cite: 73]、試験管とラックのセット [cite: 74]、小型切片保存用コルク栓付きチューブの予備 [cite: 75]、1/2オンス、1オンス、2オンスのコルク栓付き切片保存用ボトル [cite: 76, 77]、洗浄瓶 [cite: 78]、滴下ボトル6本 [cite: 79]、攪拌用ガラス棒3本 [cite: 81]、アルコールランプまたはブンゼンバーナー [cite: 82]、ガラスフィルター3個 [cite: 83]、ろ紙の予備 [cite: 84]

* ガラス製品:平底時計皿多数 [cite: 86]、目盛り付き容器2個(10cc用と500cc用) [cite: 86, 87]、3×1インチのガラススライド1グロス(学生用、緑がかった色) [cite: 88]、ガラスカバー円形(No.1と2、1/2インチ、5/8インチ、3/4インチ)各1オンスと、非常に大きな切片用の四角または長方形カバー数枚 [cite: 89, 91]

* その他:様々な厚さと直径のセル用アルミニウムリングの詰め合わせ [cite: 92]、真鍮製加熱台 [cite: 93]、サンドバスと金網付きレトルトスタンド [cite: 93]、リング用回転台 [cite: 93]

* マウント剤および試薬:カナダバルサム(ニュートラル、キシロール溶液、ベンゾール溶液)各1ボトル [cite: 94]、ゴールドサイズ [cite: 94]、ブラックアスファルトワニス [cite: 94]、マリングルー [cite: 97]、クローブオイル [cite: 97]、純グリセリンとグリセリンゼリー [cite: 97]、テレビン油 [cite: 97]、工業用変性アルコール(99.24%) [cite: 97]。工業用変性アルコールはライセンスがあれば入手可能で、安価で絶対アルコールの代わりに使用できる場合があります [cite: 98, 99, 100]。

 

使用済みのスライドは、熱い石鹸水で洗浄し、カバーガラスを取り除き、変性アルコールに浸して乾燥させることで再利用できます [cite: 115, 116, 117, 123, 124]。完璧にきれいにするには、塩酸と変性アルコールの混合物に短時間浸し、その後純粋な変性アルコールで洗浄すると良いでしょう [cite: 125]。

 

## 昆虫のマウント方法

昆虫をカナダバルサムにマウントする手順が詳細に説明されています:

  1. 捕獲したばかりの昆虫をクロロホルム蒸気、硫酸エーテル、またはシアン化カリウム瓶で殺します [cite: 130]。
  2. 昆虫を変性アルコールに浸し、必要になるまで保管します [cite: 131]。
  3. 昆虫をアルコールから通常の水に移し、3〜4時間浸してアルコールを取り除きます [cite: 133]。
  4. 次に、10%水酸化カリウムと蒸留水の混合物であるリカーポタッセに昆虫を入れ、柔らかくなるまで浸します [cite: 134, 135, 136]。
  5. 柔らかくなったら、水酸化カリウムが残らないように数回水を交換しながら水に移します [cite: 137, 138]。
  6. 水を捨て、濃酢酸を加えます [cite: 142]。作業を続けるまで浸しておきます [cite: 143]。
  7. 浅い水皿に移し、ブラシと解剖針で羽や他の部分を広げます [cite: 144]。頭や胸部を外さないように注意しながら、胸部と腹部の内容物を排出するために、肛門の方向へ優しく転がすように押します [cite: 145]。
  8. きれいな3x1インチのガラススライドを昆虫の下の水に置き、昆虫がスライドに乗るようにゆっくりと持ち上げ、余分な水を排出します [cite: 147]。
  9. 手足、羽、触角などを所定の位置に非常に注意深く置き、もう1枚のきれいなガラススライドを上から優しく重ね、昆虫が完全に平らになるまで押し付けます [cite: 148]。
  10. スライドを紐で結び、変性アルコールまたは精製テレビン油の瓶に浸し、必要になるまで保管します [cite: 149]。
  11. スライドを瓶から取り出し、できるだけ多くの液体を拭き取ります [cite: 151]。次に、細心の注意を払ってスライドを分離します [cite: 152]。
  12. 昆虫をスライドからアルコールの皿に浮かべ、30分浸します [cite: 155]。
  13. セーブル毛ブラシまたは切片リフターを使って昆虫を非常に注意深く持ち上げ、透明にするためにクローブ油の受け皿に入れます [cite: 156, 157]。
  14. クローブ油から取り出し、数分間テレビン油に浸します [cite: 158]。
  15. 昆虫をきれいな3x1インチのスライドに浮かべ、できるだけ多くのテレビン油を取り除き、各部分を所定の位置に注意深く置いた後、カナダバルサムを昆虫に少量落とします [cite: 159]。
  16. ピンセットでカバーガラスを取り、その端をスライドに接触させ、毛細管現象によってバルサムがカバーとスライドの間に入り込むようにします [cite: 160]。
  17. ピンセットの先でカバーの表面を押し、昆虫が完全に平らになり、余分なバルサムが押し出されるようにします [cite: 161]。
  18. カバーを押し下げたら、スライドを乾燥させます [cite: 162]。加熱しないと乾燥に時間がかかりますが、標本はより透明になります [cite: 163]。乾燥を早めるには、アルコールランプの炎で穏やかに加熱しますが、バルサムが沸騰して標本が乱れたり、マウントが脆くなったりしないように注意します [cite: 164]。
  19. はみ出たバルサムは、少し熱した古いナイフを使うか、キシロールや変性アルコールで湿らせた古い布で拭き取ることができます [cite: 168]。最後にベンゾール、キシロール、またはテレビン油でスライドをきれいにし、リングを付けてラベルを貼ります [cite: 169]。

 

酢酸の代わりにケイ酸を使用する方法も代替案として挙げられています [cite: 170, 171, 172, 173]。

小さな昆虫や昆虫の多くの部分は、水酸化カリウムに浸す必要はなく、テレビン油に浸してから通常の方法でマウントするだけでよい場合があります [cite: 182, 183]。クローブ油やテレビン油に浸すと、昆虫の内部器官が透明になり、簡単に観察できます [cite: 184, 188]。

 

### 完全な鱗翅目(チョウやガ)のマウント方法

完全にセットして乾燥させた標本を絶対アルコールに入れ [cite: 190]、約1時間後にアルコールを捨て、フェノール結晶25%と純キシロール75%の溶液に交換し、ろ過します [cite: 191, 192]。約1時間浸した後、純ベンゾールに交換します [cite: 193]。その後、ベンゾール中のカナダバルサムでマウントします [cite: 197]。

 

### 圧力なしで昆虫をカナダバルサムにマウントする

* **方法1:** 標本をリカーポタッセに透明になるまで浸し [cite: 223]、蒸留水でよく洗い [cite: 224]、50%変性アルコール [cite: 224]、次に純アルコールに移し、数時間放置します [cite: 225]。その後、クローブ油を加え、アルコールを蒸発させます [cite: 226]。この方法では、通常、標本内部の気泡の形成が避けられます [cite: 227]。

* **方法2:** 標本を蒸留水でよく洗い [cite: 228]、数日間純アルコールに浸します [cite: 228]。十分に透明になるまで石炭酸に移し [cite: 229]、次にクローブ油に移します [cite: 229]。この方法は、外皮が不透明すぎない場合に常に使用すべきであり、特に筋肉の研究に役立ちます [cite: 230, 232]。

 

マウントには、中央に窪みのある3×1インチのスライドを使用し、窪みの縁の内側にガラスの小さな円を3つ接着します [cite: 233]。柔らかいバルサムを中央に入れ、標本を置き、カバーガラスを置きます [cite: 234, 238, 239, 240]。バルサムが足りない場合は追加し、必要に応じて針で位置を調整します [cite: 241, 244]。スライドをワイヤークリップで固定し [cite: 245]、バルサムが固まるまで放置し [cite: 246]、余分なバルサムを除去し [cite: 246]、黒いワニスのリングで仕上げます [cite: 247]。

 

標本が深すぎる場合は、適切なセルを作成する必要があります [cite: 248]。

* **方法1:** 回転台を使ってゴールドサイズのリングを作り、完全に乾燥させます [cite: 250]。次に、マリングルーなどのセメントのリングを重ね、乾燥させ、再びゴールドサイズのリングを重ねます [cite: 251, 252]。これを必要な深さになるまで繰り返します [cite: 253]。

* **方法2:** 市販されているアルミニウムリングを使用します [cite: 254]。リングをエメリー紙で滑らかにし、セメントでスライドに接着します [cite: 255, 258, 259, 260]。セルにカナダバルサムを入れ、標本を置き、硬化させます [cite: 261, 262]。カバーガラスを優しく置き、余分なバルサムを除去し、乾燥させ、セメントと黒いワニスで仕上げます [cite: 263, 264, 265]。

 

### グリセリンでの昆虫のマウント方法

グリセリンは、多くの小さな昆虫や昆虫の一部に適しています [cite: 267]。まずアルコールで洗浄し [cite: 271]、グリセリンに浸した後、バルサムマウントと同様の方法でマウントします [cite: 271]。大きくて密度の高い標本は、透明にするために水酸化カリウムに浸す必要があります [cite: 272]。セルを作成し [cite: 273]、グリセリンで満たし [cite: 273]、標本を置き [cite: 274]、カバーガラスをセメントで密閉します [cite: 275, 276]。密閉が難しい場合は、セメントの代わりに厚いガムダンマーのリングを使用することもできます [cite: 277, 279]。

 

## 珪藻の洗浄とマウント

珪藻のマウントには、カナダバルサム(屈折率1.526) [cite: 324]、スタイラックス(欧州産1.582、米国産1.63) [cite: 327]、ハイラックス(合成樹脂1.71) [cite: 333]、サイラックス(合成樹脂1.8) [cite: 346]、ピペリン(1.681) [cite: 351]、ピクリン酸ピペリン(1.681) [cite: 351]、レアルガー(2.549) [cite: 353]などのマウント剤が使用されます。各マウント剤には特徴があり、特にハイラックスやサイラックスは細かい珪藻に適していますが、冷却時にスライドから剥がれることがあります [cite: 334, 345, 349]。レアルガーは非常に高い屈折率を持ちますが、取り扱いが難しく危険です [cite: 353]。

 

珪藻を藻類や不要なゴミから除去するには、塩酸で有機物を煮沸し [cite: 363]、炭酸カルシウムを排除します [cite: 364]。次に、珪藻が沈殿するまで水で繰り返し洗浄し [cite: 379, 380, 381]、硫酸と二クロム酸カリウムで有機物を完全に分解します [cite: 384, 386]。化石珪藻土の洗浄には、酢酸ナトリウムで繰り返し結晶化させ [cite: 395, 401, 407]、塩酸と硫酸、塩素酸カリウムで不純物を除去する方法が紹介されています [cite: 411, 413, 415]。

 

乾燥マウントの場合、洗浄した珪藻を蒸留水が入った小瓶に保存し [cite: 434]、使用時にカバーガラスに1滴落とし [cite: 437]、アルコールランプやブンゼンバーナーの炎で乾燥させます [cite: 438]。完全に乾燥させるため、赤熱するまでカバーガラス上で焼きます [cite: 439, 443]。その後、スライドにゴールドサイズのリングを引き [cite: 445]、カバーガラスを貼り付け [cite: 449]、黒いアスファルトワニスで仕上げます [cite: 450]。

 

カナダバルサムでのマウントは、洗浄した珪藻をカバーガラス上で乾燥させ [cite: 452, 453]、バルサムを滴下して12時間放置します [cite: 453]。次に、温めたスライドにカバーガラスを接触させ、バルサムが広がるように加熱し [cite: 454, 455, 456, 457]、硬化させ、アスファルトワニスで仕上げます [cite: 458]。

 

ハイラックスでのマウントは、珪藻を焼いたカバーガラスにキシロールを滴下し、空気を除去します [cite: 469]。冷たいハイラックスをスライドの中央に置き [cite: 470]、カバーガラスを逆さまにしてその上に置きます [cite: 471]。スライドを加熱台で48時間ほど加熱し [cite: 472]、はみ出たマウント剤をベンゾールで湿らせた綿で拭き取り [cite: 477]、さらに24時間加熱します [cite: 477]。

 

## 化学結晶のマウント

多くの塩はカナダバルサムに可溶であるか、その形状が損なわれるため、グリセリン、ゴム水、またはヒマシ油、あるいは乾燥状態でマウントする必要があります [cite: 686]。

 

* **方法1:** 飽和塩溶液をアルコールに滴下して結晶を生成し(アルコールに不溶の場合) [cite: 687]、ピペットで結晶をカバーガラスに落とし [cite: 688]、乾燥させ [cite: 689]、バルサムでマウントします [cite: 689]。

* **方法2:** 蒸留水に強力な塩溶液を作り、ゴム水を数滴加えるか、少量のゼラチンを加えます [cite: 690]。ピペットで溶液をカバーガラスに落とし [cite: 691]、ゆっくり乾燥させ [cite: 692]、バルサムでマウントします [cite: 695]。

* **方法3:** 少量の塩をスライドに置き、アルコールランプの炎で溶けるまで加熱します [cite: 696]。熱い針で塩を広げ [cite: 697]、冷まして結晶を形成させ [cite: 698]、バルサムとカバーガラスでマウントします [cite: 698]。

 

ヒマシ油やグリセリンでマウントする必要がある場合は、回転台を使ってスライドにシェラックセメントのリングを作り、乾燥させ [cite: 700]、さらにセメントのリングを重ね、セルをヒマシ油で満たします [cite: 701]。結晶化した標本をカバーガラスに置き、油に接触させ [cite: 702]、カバーガラスをシェラックリングに優しく押し付け [cite: 703]、余分な油を拭き取り [cite: 704]、シェラックセメントでリングを仕上げます [cite: 704]。

 

## その他の標本

デンプン、植物結晶(ラフィデス)、植物の鱗片や毛、魚の鱗、軟体動物の口蓋、骨、蹄、角、羽根、筋肉繊維、毛髪、繊維などのマウント方法も詳細に説明されています [cite: 727, 737, 743, 749, 756, 765, 766, 770]。

 

## 岩石と金属切片の準備

岩石の切片は、ハンマーとノミで小さな破片を剥がし [cite: 783]、砥石や鉄板、エメリー粉を使って片面を滑らかにします [cite: 783, 784, 785]。カナダバルサムでスライドに固定し [cite: 787, 788]、反対側を非常に薄くなるまで研磨し [cite: 789]、洗浄して乾燥させます [cite: 794]。その後、きれいなスライドに移し [cite: 795]、カバーガラスをカナダバルサムで取り付けます [cite: 796, 797]。骨、歯、果実の種子、その他の硬い物質も同様に処理しますが、研磨後アルコールとクローブ油に通してからマウントします [cite: 799]。石灰岩や石炭などの非常に柔らかい物質は、目の細かい糸鋸で切り [cite: 800]、ベンゾールに浸した後 [cite: 800]、バルサム溶液に浸して組織に浸透させます [cite: 801]。その後、スライドに置き、カナダバルサムで覆い [cite: 802]、乾燥させ [cite: 805]、加熱台で焼いてバルサムを硬化させます [cite: 806]。

 

金属標本の準備は、1/2〜1インチ角または直径の大きさが適切です [cite: 809]。金鋸で切断し [cite: 810]、熱を加えないように注意します [cite: 812]。片面をやすりやグラインダーで平らにし [cite: 813, 814]、粗いエメリー紙から細かいエメリー紙へと徐々に研磨します [cite: 817, 818, 819, 820]。その後、水で洗浄し [cite: 821]、ルージュやアルミナ(ダイアマンティン)などの研磨粉で研磨パッドを使って磨きます [cite: 821, 822, 823, 824]。研磨後、表面に傷がないことを確認し [cite: 825]、水道水で洗い [cite: 828]、乾燥させます [cite: 828]。非常に柔らかい金属(銅やアルミニウム)は、軽い圧力でゆっくりと回転するディスクで研磨し、必要に応じて金属研磨剤を使用します [cite: 831, 832, 833]。最も細かい構造を明らかにするためには、エッチングが必要です [cite: 835]。保護ワニスで側面を覆い、試薬(希硝酸、硫酸、アンモニア、水酸化カリウムなど)に浸します [cite: 840, 837]。約20秒間反応させ [cite: 841]、アルコールや変性アルコール、水で洗浄し [cite: 841, 842]、乾燥させます [cite: 842]。エッチングが不十分な場合は、さらに20秒間繰り返します [cite: 843]。金属標本は空気中の湿気を吸収するため、塩化カルシウムを入れた容器に保管します [cite: 844]。

 

## 血液塗抹標本と細菌

血液塗抹標本の作製と染色、細菌のフィルム作製と染色、特に鞭毛を染色する方法が記載されています [cite: 848, 895, 939]。

 

## 動物組織の準備

ほとんどの動物組織は、切片を切る前に硬化させる必要があります [cite: 1025]。硬化剤には、アルコール、硝酸、ピクリン酸など、その後の染色プロセスを妨げないものと、オスミウム酸、クロム酸など、染色剤の作用に多かれ少なかれ影響を与えるものがあります [cite: 1027, 1028, 1029]。組織を硬化させる際には、標本が液体に完全に浸透していることが重要であり、大量の液体に浸す必要があります [cite: 1030, 1031]。組織はできるだけ新鮮であるべきで、固定液は頻繁に交換する必要があります [cite: 1032, 1033]。

 

いくつかの固定液が紹介されています:

* **アルコール:** 作用は非常に速いが、固定剤としてはあまり適していません [cite: 1043]。95%濃度のものが使用され、頻繁に交換する必要があります [cite: 1044, 1045]。

* **工業用変性アルコール (99.24%):** 一般的に使用でき、安価です [cite: 1047]。標本を収縮させる傾向がありますが、約10日で硬化します [cite: 1048, 1051]。

* **クロム酸とアルコール:** 1/6%クロム酸溶液1部と変性アルコール2部を混合して使用します [cite: 1053]。組織が硬くなったらアルコールに移します [cite: 1055]。

* **二クロム酸カリウム:** 2%水溶液を使用し、組織は約3週間で硬化します [cite: 1058, 1059]。その後、変色しなくなるまで変性アルコールに毎日交換して移します [cite: 1060]。

* **ブアン液:** 飽和ピクリン酸水溶液75cc、40%ホルマリン25cc、氷酢酸5ccの混合物です [cite: 1062, 1063]。組織を12〜24時間浸し、70%アルコールで洗浄します [cite: 1063, 1064]。一般的な組織学構造の固定剤として優れています [cite: 1067]。

* **二クロム酸アンモニウム:** 2%水溶液を使用し、数週間標本を浸します [cite: 1069]。二クロム酸カリウムと同様に使用します [cite: 1070]。

* **ミュラー液:** 二クロム酸カリウム25gと硫酸ナトリウム10gを水1000ccに溶解して作ります [cite: 1072]。浸透力が高く、硬化は遅く、5〜7週間かかります [cite: 1073]。初期の固定剤として有用ですが、その後収縮力の高いクロム酸とアルコール溶液やアルコールに続くことが多いです [cite: 1074, 1075]。

* **ゼンカー液:** ミュラー液1000ccに塩化水銀50gを加え、使用直前に氷酢酸50ccを加えます [cite: 1077, 1078]。組織を6〜24時間浸し、流水で洗浄し、アルコールに移します [cite: 1078, 1081, 1082, 1084]。

* **ホルマリン (ホルムアルデヒド), 40%:** 一般的な固定剤として使用できますが、通常は推奨されません [cite: 1087]。5%生理食塩水溶液を使用し、24〜48時間浸します [cite: 1088, 1089]。

* **カルノイ液:** 氷酢酸10cc、クロロホルム30cc、絶対アルコール60ccの混合物です [cite: 1092]。組織を12〜60分間浸し [cite: 1093]、90%アルコールで洗浄します [cite: 1094]。浸透力が非常に高く、細胞学作業に適しています [cite: 1095]。

* **フレミング液:** 1%クロム酸水溶液15cc、氷酢酸1cc、2%オスミウム酸4ccの混合物です [cite: 1099, 1100]。組織を12〜24時間浸し [cite: 1101]、流水で洗浄し、アルコールに移します [cite: 1102, 1103]。

* **ピクリン酸:** 冷たい飽和水溶液を使用し、組織を12〜48時間硬化させます [cite: 1105]。胎児の骨の脱灰や軟骨に適しています [cite: 1106]。

* **昇汞:** 組織を非常に迅速に固定できます [cite: 1109]。5%氷酢酸の飽和溶液に組織を浸し [cite: 1109, 1110]、不透明になったら取り出し、70%アルコールとヨウ素チンキで洗浄します [cite: 1111, 1114]。

* **オスミウム酸:** 脂肪を染色し、有髄神経繊維を黒くする作用を持つ硬化剤です [cite: 1118]。高価で毒性があり、光にさらされると劣化します [cite: 1119]。密閉された黒いガラス瓶に保管します [cite: 1120]。

* **クロム酸と硝酸溶液:** 1/6%クロム酸水溶液に硝酸を5滴加えます [cite: 1125]。骨、歯などの硬い標本を柔らかくするために使用されます [cite: 1126]。

 

脱灰、透明化、切片の透明化についても説明されています [cite: 1154, 101, 102]。

 

## 植物組織の準備とマウント

植物組織の準備とマウント方法について、以下のように説明されています。

* **固定と硬化:** 可能な限り新鮮な材料を使用することが推奨されます [cite: 126]。茎、葉、子房、根などの材料は、切片を切る前に硬化させる必要があります [cite: 126]。これには、スピリットに1〜2週間浸し、スピリットを24時間ごとに数回交換する方法があります [cite: 126]。

* **固定液:**

    * ブアン液 (79ページ参照) は核作業に適しています [cite: 126]。

    * カルノイ液 (81ページ参照) は同様の材料に適しています [cite: 126]。

    * 藻類や菌類には、2〜4%ホルムアルデヒド溶液 (81ページ参照) やクロム酢酸液が使用されます [cite: 126]。

    * 90%アルコール溶液は一般的な固定剤として便利です [cite: 126]。

* **漂白:** 繊細な組織の場合、染色前に漂白する必要があります [cite: 126]。これには、水1パイントに2オンスの新鮮な次亜塩素酸カルシウムを加え、よく振ってから、澄んだ液を暗い場所に密閉保存します [cite: 126]。

* **切断と包埋:**

    * 植物材料は、手で必要な薄さに切断することも、ミクロトームで切断することもできます [cite: 126]。

    * 茎や根の切片など、単純な作業の場合、材料はキャスカーツ・ダーラストンミクロトームのくぼみに包埋できます [cite: 126]。

    * パラフィンワックスまたはセロイジンに包埋する場合は、先に材料を十分に脱水する必要があります [cite: 126]。

* **染色:**

    * **二重染色 (モルダント溶液):** 硫酸塩10gを蒸留水200ccに溶かしたものをと、酢酸鉛30gを蒸留水600ccに溶かしたものを混ぜて、沈殿物が止むまで放置し、ろ過して保存します [cite: 128]。これを4倍に希釈して使用します [cite: 128]。

    * **ホウ砂カルミン染色:** ホウ砂カルミン溶液で1〜2時間染色します [cite: 128]。

    * **酸性アルコールでの洗浄:** 1ドラム硝酸を水1パイントに加えた酸性アルコールで洗浄します (1:160) [cite: 128]。

    * **水での迅速な洗浄:** 純粋な水で迅速に洗浄します [cite: 128]。

    * **アルコールに1時間浸す:** [cite: 128]

    * **緑色染色:** 緑色染色液に1〜3時間浸します [cite: 128]。

        * 緑色染色液の調合法: アシッドグリーン2g、蒸留水75cc、グリセリン28ccを混ぜ、ろ過して密閉保存します [cite: 128]。

    * **絶対アルコールで洗浄:** [cite: 129]

    * **キシロールフェノールで透明化:** [cite: 129]

    * **キシロールバルサムでマウント:** [cite: 129]

    * **ピクリンカルミン二重染色:** カルミン2gを液体アンモニア1/2ドラム、蒸留水28ccに溶かし、ピクリン酸8gをアルコール28ccに溶かしたものを混ぜて使用します [cite: 129]。

    * **サフラニンとメチレンブルーまたはエリスロシンでの二重染色:** サフラニンまたはメチレンブルーをアルコールに溶かしたものを使用します [cite: 130]。

    * **クチクラと葉毛の染色:** 次亜塩素酸ソーダでマウントし、漂白し、2%アニリンブルー水溶液で染色します [cite: 131]。

* **藻類の染色とバルサムマウント:** 10%ホルムアルデヒドで固定し、蒸留水で洗浄し、デラフィールドのヘマトキシリンを30%アルコールで希釈して染色し、各種濃度のアルコールで脱水し、キシロールで透明化し、キシロールバルサムでマウントします [cite: 132]。

* **花粉のマウント:** 花粉を含む葯を乾燥させ、ピンセットで不要な葯を取り除き、テレビン油が入った瓶に花粉を入れ、数日間放置して空気を取り除きます [cite: 132]。少量のカナダバルサムをカバーガラスに滴下し、花粉を入れ、温めたスライドに静かにカバーガラスを降ろし、固まるまで押さえつけます [cite: 133]。

* **小粒種子、胞子、粉末薬剤:** 同様の方法でマウントできます [cite: 133]。

* **セロソルブ:** エチレングリコールモノエチルエーテルという新しい試薬が紹介されています [cite: 133]。アルコールの代わりになる脱水剤で、水、アルコール、キシロールに溶けます [cite: 133]。染色された標本は、セロソルブに30秒〜1分浸した後、クローブ油で透明化し、カナダバルサムでマウントできます [cite: 133]。

 

## グリセリンとグリセリンゼリーでのマウント

* グリセリンゼリーは、気密容器に冷暗所で保管する必要があります [cite: 136]。

* **マウント方法:**

  1. ジャム瓶にグリセリンゼリーを入れ、熱湯で溶かします [cite: 136]。
  2. スライドにあらかじめゼリーを塗っておき、温めます [cite: 136]。
  3. 温めたスライドに少量の溶けたゼリーを滴下し、中央に標本を置きます [cite: 136]。
  4. 気泡が入らないように、きれいなカバーガラスをゼリーの表面に置き、針の先で押さえて平らにし、冷まします [cite: 136]。
  5. 余分なゼリーは水で丁寧に洗い流し、2〜3層のガムダンマーでリングを施し、その後、数層のセメントとワニスで仕上げます [cite: 136]。

    * 別の方法として、カバーガラスを加熱しながら所定の位置に保持する方法もあります [cite: 136]。

* **グリセリンゼリーの特徴:** 大量の標本のマウントに適した媒体です [cite: 137]。サンゴ、ボルボックス、デスミッド、コケ植物、マイコゾア、スピラル、スカラリフェラス血管、デンプン、ラフィデスなど、多くのものが適しています [cite: 137]。

* **純グリセリンと希釈グリセリン:**

    * 純粋で希釈されていないグリセリンは、多くの標本を密封する際に困難を伴うため、推奨されません [cite: 137]。

    * グリセリンでマウントする標本は、希釈グリセリンに徐々に慣らす必要があります [cite: 139]。

    * グリセリンはログウッド染色に悪影響を与えますが、酢酸でわずかに酸性化された場合は、カルミンやピクリン酸カルミンを攻撃しません [cite: 140]。

* **ボルボックス・グロバトール(Dr. T. Stephanidesの方法):** ボルボックスを様々な濃度のグリセリン(10%、25%、50%、75%)に浸し、変形を防ぎます [cite: 140]。永久マウントを作成するには、スライドに純グリセリンを滴下し、カバーガラスを適用します [cite: 140]。セメントセルで支持が必要な場合もあります [cite: 140]。

* **水棲ポリゾア、ロフォプス、クリスタテラ、海洋ブリオゾア、ヒドロゾア:** グリセリン20%をホルマリン5%で希釈したものは、これらの新鮮な水棲ポリゾアをマウントするのに適しており、驚くほど保存できます [cite: 140]。

* **昆虫を麻酔させる方法 (Mr. E. R. Newmarchの方法):** 大量のメントール結晶を使用し、ガラス片をカバーとして皿の上に置きます [cite: 142]。

 

## 不透明マウント

恒久的で満足のいくマウントを得るには、標本が完全に清潔であり、すべての汚れや異物が除去されていること、そして標本が完全に乾燥していることの2点が重要です [cite: 146]。不透明マウントは、菌類の成長によりカバーガラスが曇ることがあります [cite: 146]。乾燥を促進するため、乾燥剤の使用が勧められています [cite: 146]。乾燥剤には、塩化カルシウムや炭酸カリウムなどの吸湿性物質が使用されます [cite: 146, 148]。

 

* **マウント方法:**

    * 回転台を使って、3×1インチのスライドの中央に黒いワニスのディスクを作り、乾燥させます [cite: 147]。

    * または、切り抜いた黒い紙のディスクをスライドに接着し、少量の接着剤で固定します [cite: 147]。

    * アルミニウムリングを同じく接着剤で取り付け、その縁も同様に覆います [cite: 147]。

    * セルの準備ができたら、標本をバルサムにマウントします [cite: 147]。黒い背景が必要な場合は、黒いバルサムを使用します [cite: 147]。

    * 別の方法として、カバーガラスに少量の黒いワニスを塗り、乾燥させ、ガムダンマーをベンゾールに溶かしたものでリングを施します [cite: 147]。温めたカバーガラスを置くと、ダンマーが柔らかくなります [cite: 147]。アルコール性シェラックでリングを仕上げます [cite: 147]。

    * 乾燥したら、バルサムを剥がし、ベンゾールで拭き取り、黒いアスファルトワニスでリングを仕上げます [cite: 148]。

    * アルミニウムリングを使用する場合、ガムダンマーをリングの内側に塗布し、タッキーになるまで待ちます [cite: 148]。セメントの層を重ねてしっかり硬化させます [cite: 148]。

* **適した標本:** 小型昆虫、特にダイアモンドカブトムシ、昆虫の卵、種子、砕かれた貴石や鉱物、有孔虫、放散虫、その他同様のものが非常に適しています [cite: 149]。

 

## 調合法(フォーミュラ)

いくつかの溶液の調合法が記載されています。

* **水酸化カリウム溶液:** 水酸化カリウム50g、水1リットル [cite: 150]。水酸化ソーダで代用することもできます [cite: 150]。

* **ヨウ素溶液:** ヨウ素3g、ヨウ化カリウム4g、水0.56リットル [cite: 150]。

* **ゴム水:** アラビアゴム113g、グリセリン7g、希石炭酸水113cc [cite: 150]。

* **グリセリンと酢酸:** グリセリン50cc、氷酢酸15cc [cite: 151]。

* **グリセリンとゴム (Farrants' Medium):** グリセリン100cc、亜ヒ酸1g、蒸留水200cc、アラビアゴム(またはアカシアゴム)130g [cite: 151]。

* **ディーンの媒体:** ネルソンゼラチン28g、蜂蜜141.5g、アルコールまたはスピリットオブワイン15cc、水140cc [cite: 152]。

* **藻類用マウント液:** 酢酸銅1g、カンファー水110cc、蒸留水110cc、氷酢酸2cc [cite: 152]。

* **ゴールドサイズ:** 亜麻仁油140cc、レッドリード28g、粉末ホワイトリード28g、イエローオーカー28g [cite: 153]。

* **黒ワニス (Davies):** インディアンラバー細断30g、エジプトアスファルト28g、溶剤ナフサ(鉱物性)300cc [cite: 153]。

* **茶ワニス:** インディアンラバー細断20g、ビスルフィド炭素必要量、シェラック55g、変性アルコール225cc [cite: 153]。

* **黒ワニス:** ガムダンマー25cc、ガムマスティック25cc、ベンゾール170cc、ランプブラック必要量 [cite: 154]。

* **セメント:** レジン70cc、蜜蝋14g、カナダバルサム3.5cc [cite: 154]。

* **シェラックセメントまたはワニス:** 変性アルコールにシェラックの小さな薄片を溶かしたもの [cite: 155]。

* **マリングルー (ゴムセメント):** インディアンラバー細断55g、シェラック55cc [cite: 155]。

* **ホワイトジンクセメント (Walmsley):** 亜鉛白と大きなボトル、ベンゾール、ゴムダンマー飽和溶液を使用 [cite: 155, 156]。

* **ユーパラール (屈折率1.438):** カナダバルサムの代わりにマウントに使用される中性媒体 [cite: 156]。

* **ユカタンエレミ:** キシロールに溶かしてカナダバルサムの代わりに使用される、酸性が弱く染色に影響が少ない物質 [cite: 156]。

 

## 重さ、量、換算表

アヴォワールデュポワ重さ、薬剤師の重さ、薬剤師の量、英国とメートル法の比較、換算表、屈折率のリストが記載されています [cite: 157, 158, 159]。

 

## 参考文献

顕微鏡観察に関連する様々な書籍や定期刊行物が参考文献として挙げられています [cite: 160]。

 

## 中古顕微鏡と付属品

Broadhurst, Clarkson & Co., Ltd. (ロンドン、ファリンドン通り63番地) が中古の顕微鏡スライド(6ペンスから)や新品・中古の望遠鏡、双眼鏡、単眼鏡、オペラグラスを販売しています [cite: 162]。光学機器の修理も行っており、現金での買い取りもしています [cite: 162]。